詳述支原體檢測(cè)試劑盒的原理特征

 　　支原體，又稱霉形體，沒有細(xì)胞壁的原核生物，為目前發(fā)現(xiàn)的zui小的zui簡(jiǎn)單的原核生物。支原體細(xì)胞中*可見的細(xì)胞器是核糖體。它對(duì)許多抗生素具有抗性，如類胸膜肺炎微生物。

　　支原體檢測(cè)試劑盒是利用支原體酶的這一特定活性，進(jìn)行選擇性的生物化學(xué)檢測(cè)。這些酶的存在提供了一種快速的篩選操作，能靈敏地檢測(cè)出樣本中的支原體污染。

　　支原體檢測(cè)試劑盒的原理

　　這些存活的支原體被溶解，然后釋放出來的酶與支原體檢測(cè)試劑盒中提供的底物發(fā)生催化反應(yīng)，將ADP轉(zhuǎn)化成ATP。通過測(cè)量樣品中添加底物前后ATP的含量，可以得到一個(gè)比率，該比率指示支原體是否存在。如果這些酶不存在，第二次讀數(shù)相對(duì)于*次讀數(shù)就沒有增加;如果酶與底物進(jìn)行特異性反應(yīng)，就會(huì)導(dǎo)致ATP含量上升。ATP含量的上升通過生物發(fā)光化學(xué)反應(yīng)可以檢測(cè)到，其公式如下：

　　Luciferase

　　ATP + Luciferin + O2 ——————> Oxyluciferin + AMP

　　Mg 2+ + PPi + CO2 + LIGHT

　　這個(gè)反應(yīng)的發(fā)生是在室溫(18°C～22°C)進(jìn)行的，也是熒光素酶反應(yīng)的*溫度。在支原體檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)原理中，zui后通過分光光度計(jì)讀數(shù)，由于發(fā)出光的強(qiáng)度與ATP的濃度成線性關(guān)系，因此可檢測(cè)支原體的污染問題。

　　支原體檢測(cè)試劑盒的特征

　　支原體檢測(cè)試劑盒是專門檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)過程中是否被支原體污染的經(jīng)典試劑盒，它包含檢測(cè)所用到的各種試劑和產(chǎn)品操作手冊(cè)。支原體檢測(cè)試劑盒具有操作簡(jiǎn)單、快速、結(jié)果穩(wěn)定可靠、靈敏度*等優(yōu)點(diǎn)，讓您在支原體檢測(cè)時(shí)輕松容易，并確保您的培養(yǎng)潔凈無污染。該支原體檢測(cè)試劑盒的主要特征如下：

　　快速。20分鐘內(nèi)即可診斷出你的細(xì)胞培養(yǎng)是否健康無污染，而其它方法一般要幾個(gè)小時(shí)到一周的時(shí)間。

　　適用性好。可以檢測(cè)所有支原體和無膽甾原體在常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染。

　　靈敏度高。可檢測(cè)<50 cfu/ml的支原體，避免出現(xiàn)像PCR和熒光染色方法出現(xiàn)的陰性結(jié)果。

　　方便。只需把你的細(xì)胞培養(yǎng)物與兩種試劑混合配成100ul，在分光光度計(jì)上讀2次數(shù)。

　　完整。該支原體檢測(cè)試劑盒包含實(shí)驗(yàn)所需的所有試劑，而不像商業(yè)PCR檢測(cè)方法中需要你提供PCR酶、核酸、限制性內(nèi)切酶和瓊脂糖電泳所需的其它試劑。

　　采用發(fā)光檢測(cè)，更能快速反映細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。避免支原體造成的損害，省力。